单纯疱疹病毒2型潜伏相关转录体ORF2的表达及其抗凋亡作用

摘要

本丈探讨了单纯疱疹病毒2型(HSV-2)潜伏相关转录体(LAT)的开放读码框2(ORF2)在细胞中的表达,及其对5-氟尿嘧啶(5-FU)诱导的非洲绿猴肾细胞(Vero)凋亡的影响.通过将重组质粒pEGPF-ORF2转染Vero细胞,绿色荧光蛋白检测转染效率,RT-PCR验证目的基因的表达,5-Fu诱导细胞凋亡,通过荧光显微镜观察凋亡小体,Gimesa染色检测细胞核形态,MTT法检测细胞的存活率,DNA ladder片段分析,结果表明,转染后绿色荧光蛋白表达效率很高,RT-PCR验证有目的基因的转录.凋亡诱导后的细胞形态正常,MTT法分析活性率与正常无差异,而显著高于空质粒组,DNA ladder未见凋亡条带.由此我们认为HSV-2 LAT ORF2基因在Vcro细胞中得到了高效表达,并且具有抗5-Fu诱导的凋亡作用.