重组鹅β-防御素12蛋白的原核表达及生物学特性

摘要

[目的]研究重组鹅β-防御素12蛋白的原核表达并探究其生物学特性.[方法]采用His标签蛋白原核表达系统,将鹅防御素12 (AvBD12)基因亚克隆到表达载体pProEX-HTa上,构建重组表达质粒.将重组表达质粒转化到大肠杆菌Rosseta感受态中,用IPTG进行诱导表达,并对该重组蛋白进行纯化.进一步采用菌落计数法测定其体外抗菌活性和盐离子稳定性.[结果]经Tricine-SDS-PAGE电泳分析,诱导表达的鹅AvBD 12重组蛋白分子量约为12 kD,大部分以包涵体形式存在.该重组蛋白对大肠杆菌、鸡白痢沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、四联球菌、枯草芽孢杆菌均具有抗菌活性,高浓度盐离子显著抑制重组蛋白的抗菌活性.此外,该重组蛋白对鸡红细胞没有溶血活性.[结论]该重组蛋白具有广谱抗菌活性,高浓度盐离子显著降低其抗菌活性,且该重组蛋白不具有溶解鸡红细胞的活性.