miR-124通过靶向调控DNMT3B抑制胃癌细胞增殖

摘要

目的明确miR-124是否通过靶向调控DNA甲基化转移酶3B（DNAmethyhransferase3B，DNMT3B）表达而抑制胃癌细胞增殖能力，从而揭示miR-124的抑瘤分子机制。方法采用MTT检测miR-124对人胃癌MKN-45细胞的增殖能力；构建DNMT3B3’UTR-荧光素酶报告载体，通过荧光素酶报告检测观察miR-124对DNMT3B3’UTR-荧光素酶活性的影响；将miR-124mimics转染胃癌细胞MKN-45，采用Westernblot检测DNMT3B表达水平。结果MTT结果显示，在转染miR-124mimics24、48和72h后OD值（0．264±0．023、0．377±0．041、0．524±0．029）分别与对照组（0．414±0．051、0．619±0．065、0．898±0．072）比较，差异均有显著性（均P〈0．05），且具有时间依赖性；荧光素报告载体系统证实DNMT3B是miR-124直接调控的靶基因。Westernblot结果显示，miR-124可抑制DNMT3B蛋白的表达。结论miR-124通过靶向调控DNMT3B的表达而抑制胃癌细胞增殖能力。