miR-124通过靶向调控DNMT3B抑制胃癌细胞增殖

摘要

目的 明确miR-124是否通过靶向调控DNA甲基化转移酶3B(DNA methyltransferase 3B,DNMT3B)表达而抑制胃癌细胞增殖能力,从而揭示miR-124的抑瘤分子机制.方法 采用MTT检测miR-124对人胃癌MKN-45细胞的增殖能力;构建DNMT3B 3′UTR-荧光素酶报告载体,通过荧光素酶报告检测观察miR-124对DNMT3B 3′UTR-荧光素酶活性的影响;将miR-124 mimics转染胃癌细胞MKN-45,采用Western blot检测DNMT3B表达水平.结果 MTT结果显示,在转染miR-124 mimics 24、48和72 h后OD值(0.264±0.023、0.377±0.041、0.524±0.029)分别与对照组(0.414±0.051、0.619±0.065、0.898±0.072)比较,差异均有显著性(均P<0.05),且具有时间依赖性;荧光素报告载体系统证实DNMT3B是miR-124直接调控的靶基因.Western blot结果显示,miR-124可抑制DNMT3B蛋白的表达.结论 miR-124通过靶向调控DNMT3B的表达而抑制胃癌细胞增殖能力.