GPC3在不同侵袭能力肝细胞癌细胞株中的表达及其与4E-BP1和PS6K的相关性研究

摘要

目的检测两种不同侵袭能力的肝细胞癌(HCC)细胞系的磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC3)、真核细胞启动因子4E结合蛋白1(4E-BP1)和核糖体S6蛋白激酶(PS6K)的mRNA和蛋白表达,并探讨3种基因与肝癌细胞转移侵袭能力的相关性。方法分别采用荧光定量聚合酶链反应和Western blotting方法检测低转移侵袭力MHCC-97L、对照细胞系HL-7702、高转移侵袭力MHCC-97H细胞系的GPC3、4E-BP1、PS6K的mRNA和蛋白表达水平,采用R语言分析3种蛋白与HCC细胞侵袭能力的相关性。结果cbioportal分析结果显示,GPC3、4E-BP1、PS6K表达异常的HCC患者生存时间明显短于表达正常的HCC患者(P<0.05),整体生存率和生存周期均降低。与HL-7702细胞系相比,MHCC-97H细胞表达的GPC3和PS6K mRNA和蛋白水平显著升高(P<0.01),4E-BP1 mRNA和蛋白水平降低(P<0.01),MHCC-97L细胞GPC3 mRNA和蛋白水平降低(P<0.01),4E-BP1 mRNA和蛋白水平升高(P<0.01)。MHCC-97H细胞表达的GPC3和PS6K mRNA水平显著高于MHCC-97L细胞(8.12±0.21比2.34±0.42,8.19±0.54比5.23±0.25)(P<0.01),4E-BP1 mRNA水平低于MHCC-97L细胞(1.28±0.45比9.13±0.12)(P<0.01)。MHCC-97H细胞表达的GPC3和PS6K蛋白水平显著高于MHCC-97L细胞(0.82±0.01比0.34±0.04,0.82±0.07比0.31±0.02)(P<0.01),4E-BP1蛋白水平低于MHCC-97L细胞(0.18±0.07比1.13±0.03)(P<0.01)。经R语言编程进行相关性矩阵分析显示,在MHCC-97L中,GPC3与4E-BP1呈负相关(r=-0.850),GPC3与PS6K呈正相关(r=0.868),PS6K与4E-BP1呈负相关(r=-0.898);在MHCC-97H中,GPC3与4E-BP1呈负相关(r=-0.877),GPC3与PS6K呈正相关(r=0.888),PS6K与4E-BP1呈负相关(r=-0.898)。结论GPC3和PS6K的mRNA和蛋白水平随着HCC转移侵袭能力的增强而升高,PS6K与GPC3表达呈正相关。4E-BP1的表达则随着HCC转移侵袭能力的增强而降低,与GPC3的表达呈负相关,且这3种蛋白的表达均与HCC转移侵袭能力的增强密切相关。