转染HBx改变Notch信号诱导肝癌HepG2细胞株多药耐药性研究

摘要

目的研究转染HBx对Notch信号通路的影响，分析其诱导肝癌多药耐药（MDR）的发生机制。方法选用人肝癌HepG2细胞株进行转染，根据HBx转染情况将细胞分为转染HBx细胞组(HepG2-HBx组)、转染空载体细胞组(HepG2-con组)和空白细胞组(HepG2组)。实时定量聚合酶链反应（PCR）检测3组细胞HBx mRNA表达。蛋白免疫印迹法（Western-blot）检测3组细胞HBx、Notch-1和多药耐药蛋白（MRP）表达，CCK-8法检测3组细胞增殖活性和耐药性。结果HepG2-HBx组有HBx片段和HBx蛋白表达，HepG2-con组和HepG2组未见HBx mRNA和蛋白表达。与HepG2组和HepG2-con组比较，HepG2-HBx组细胞增殖加快，Notch-1和MRP蛋白表达增加（P＜0.05）。细胞周期检测结果显示，与HepG2组和HepG2-con组比较，HepG2-HBx组G0/G1期细胞显著减少，S期细胞增加(P＜0.05，P＜0.01)。MDR实验显示，HepG2-HBx组对5种药物的耐药指数增加明显(P＜0.05)。结论转染HBx的肝癌HepG2细胞株可能通过诱导Notch-1与MRP的过表达，最终导致肝癌HepG2细胞增殖力增强和MDR的发生。