鸢尾素抑制小鼠骨样MLO-Y4细胞凋亡的作用机制研究

摘要

目的 为探讨鸢尾素对骨保护作用的机制,应用鸢尾素干预H2O2导致的小鼠骨样细胞MLO-Y4细胞凋亡实验,观察鸢尾素在骨样细胞凋亡过程中的保护作用.方法 体外分组处理小鼠骨样细胞MLO-Y4,处理方式如下:对照组、H2O2组(600μMH2O2处理6 h)、H2O2+鸢尾素组(1、10、100、200 ng/ml)浓度梯度组分别孵育48 h.Cell Counting Kit-8试剂盒检测细胞增殖活性.分别检测对照组、H2O2组、H2O2+鸢尾素组骨样细胞凋亡的变化,Annexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡率,RT-qPCR技术检测各组细胞细胞凋亡相关基因Tfam、Bc12、Bax和Puma的mRNA表达.结果 与对照组比较,H2O2组细胞增殖明显下降(P＜ 0.01);与H2O2组相比,H2O2+100 ng/ml和H2O2+200 ng/ml鸢尾素处理细胞的增殖活性均升高(P＜ 0.05).选择鸢尾素100 ng/ml为最佳浓度,检测不同处理对细胞凋亡的影响发现,与H2O2组相比,H2O2+鸢尾素组的细胞凋亡率明显下降(21.03％,P＜0.01);Tfam、Bax和Puma mRNA 的表达量明显下降(P＜ 0.01),而Bcl-2 mRNA 表达量显著升高(P ＜ 0.01).结论 鸢尾素可能通过抑制线粒体凋亡信号,改善H2O2造成的小鼠骨样细胞增殖活性减低,减少细胞凋亡的发生.