鸾尾素抑制小鼠骨样MLO-Y4细胞凋亡的作用机制研究

摘要

I目的为探讨鸢尾素对骨保护作用的机制,应用鸢尾素干预H202导致的小鼠骨样细胞ML0-Y4细胞凋亡实验,观察鸢尾素在骨样细胞凋亡过程中的保护作用方法体外分组处理小鼠骨样细胞ML0-Y4,处理方式如下:对照组、H202组(600μM HA处理6 h)、H202+鸢尾素组(1、10、100、200 ng/ml)浓度梯度组分别孵育48 h。Cell Counting Kit-8试剂盒检测细胞增殖活性。分别检测对照组、H202组、H202+鸢尾素组骨样细胞凋亡的变化,Armexin V-FITC/PI凋亡检测试剂盒检测细胞凋亡率,RT-qPCR技术检测各组细胞细胞凋亡相关基因Tfam、BC12、BaX和Puma的mRNA表达。结果与对照组比较,H202组细胞增殖明显下降(P<0.01);与H202组相比,H202+100 ng/ml和H202+200 ng/ml鸢尾素处理细胞的增殖活性均升高(P<0.05)。选择鸢尾素100 ng/ml为最佳浓度,检测不同处理对细胞凋亡的影响发现,与H202组相比,H202+鸢尾素组的细胞凋亡率明显下降(21.03%,P<0.01);Tfam、Bax和Puma mRNA的表达量明显下降(P<0.01),而Bd-2 mRNA表达量显著升高(P<0.01)。结论鸢尾素可能通过抑制线粒体凋亡信号,改善H202造成的小鼠骨样细胞增殖活性减低,减少细胞凋亡的发生。