慢病毒介导的CIB1过表达对U87胶质瘤细胞WNT信号通路的影响

摘要

目的:探讨慢病毒介导的钙整合素结合蛋白1(calcium integrin-binding protein 1,CIB1)在U87胶质瘤细胞中的表达情况及对WNT信号通路的影响.方法:体外培养U87胶质瘤细胞,将携带CIB1基因的LV-CIB1慢病毒转染至U87细胞,获得CIB1稳定过表达的U87脑胶质瘤细胞.根据感染病毒的不同,将细胞分为LV-CIB1过表达组、阴性对照病毒组和正常U87细胞对照组.采用蛋白免疫印迹法检测U87胶质瘤细胞中相关蛋白表达情况,Edu法检测CIB1过表达对U87细胞增殖的影响.结果:LV-CIB1感染U87胶质瘤细胞的最佳感染复数值为4.LV-CIB1过表达组CIB1蛋白表达水平显著高于正常U87细胞对照组和阴性对照病毒组.与正常U87细胞对照组及阴性对照病毒组相比,LV-CIB1过表达组WNT信号通路中关键蛋白GSK-3β 表达量降低,β-catenin、cyclin Dl 及Phospho-GSK-3(3(Ser9)的表达水平升高,Phospho-GSK-3β(Tyr216)无明显变化.结论:CIB1过表达促进U87胶质母细胞瘤的生长增殖.WNT信号通路可能是CIB1发挥作用的途径之一,提示可以通过干预WNT信号通路来调节CIB1介导的U87胶质瘤细胞增殖.