抗肝癌hdsFv融合hEDN重组免疫毒素对体外培养的人肝癌细胞的杀伤作用

摘要

目的:探讨重组免疫毒素hdsFv-hEDN在大肠杆菌中的可溶性表达和纯化,观察其体外杀伤作用.方法:利用IPTG诱导hdsFv- hEDN免疫毒素在大肠杆菌中的表达.诱导转化菌经超声碎菌、离心、Ni-NTA Agarose亲合层析等步骤纯化,并通过SDS-PAGE和Western-blot进行分析及检测.采用MTT比色法观察其对人肝癌细胞的杀伤作用.结果: IPTG诱导后,hdsFv- hEDN在大肠杆菌中获得了可溶性表达,表达量为8%.表达产物纯化后,纯度达到基本均一.MTT结果表明,其对人肝癌细胞具有一定的杀伤作用.结论:本研究实现了hdsFv- hEDN重组免疫毒素在大肠杆菌中的可溶性表达及纯化,获得了具有一定杀伤作用的抗肝癌重组免疫毒素.