草苁蓉多糖对人肝癌细胞侵袭迁移的影响及机制

摘要

目的 探讨草苁蓉多糖(BRPS)对人肝癌细胞侵袭迁移的影响及其可能机制.方法 使用不同浓度的BRPS(12.5、25、50、100、200μg/L)干预肝癌HepG2细胞,筛选合适作用浓度.取对数生长期细胞,随机分为对照组(不作处理)、缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)组(转染LV-HIF-1α)、HIF-1α-NC组(转染LV-HIF-1α-NC)、BRPS组(加入50μg/L BRPS)、BRPS+HIF-1α组(转染LV-HIF-1α,加入50μg/L BRPS),采用Hoechst33258染色观察肝癌细胞凋亡情况,流式细胞术检测肝癌细胞凋亡率,划痕实验检测肝癌细胞迁移能力,Transwell实验检测肝癌细胞侵袭能力,Western blotting检测肝癌细胞中HIF-1α以及上皮-间质转化(EMT)标志物E-钙黏蛋白、波形蛋白的表达水平.结果 选取BRPS浓度50μg/L进行实验.Hoechst33258染色结果显示,对照组和HIF-1α-NC组蓝色荧光微弱,HIF-1α组蓝色荧光较弱,BRPS组蓝色荧光较强,BRPS+HIF-1α组蓝色荧光较BRPS组减弱.与对照组[细胞凋亡率:3.89％±1.25％,划痕愈合率:63.35％±3.35％,穿膜细胞数:(122.60±3.29)个]比较,HIF-1α组细胞凋亡率(1.67％±0.86％)降低,划痕愈合率(87.48％±3.92％)增高,穿膜细胞数[(208.60±6.17)个]增多,BRPS组细胞凋亡率(26.58％±1.63％)增高,划痕愈合率(14.82％±3.81％)降低,穿膜细胞数[(68.80±4.25)个]减少,差异有统计学意义(P<0.05);BRPS+HIF-1α组细胞凋亡率(12.14％±1.05％)高于HIF-1α组,低于BRPS组,划痕愈合率(32.59％±3.76％)、穿膜细胞数[(123.40±4.94)个]低于HIF-1α组,高于BRPS组,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,HIF-1α组HIF-1α、波形蛋白表达水平升高,E-钙黏蛋白表达水平降低,BRPS组HIF-1α、波形蛋白表达水平降低,E-钙黏蛋白表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);BRPS+HIF-1α组HIF-1α、波形蛋白表达水平低于HIF-1α组,高于BRPS组,E-钙黏蛋白表达水平高于HIF-1α组,低于BRPS组,差异有统计学意义(P<0.05).结论 BRPS可促进肝癌HepG2细胞凋亡,抑制其迁移和侵袭,其机制可能为通过调控HIF-1α而抑制EMT的发生.