过表达hnRNPAB基因对结直肠癌细胞上皮-间质转化的影响及其分子机制

摘要

目的 探讨过表达hnRNPAB基因对人结直肠癌SW480、HT29细胞上皮-间质转化(EMT)的影响及其分子机制.方法 分别用过表达hnRNPAB的慢病毒和阴性对照病毒转染SW480、HT29细胞,设置实验组(SW480-hnRNPAB、HT29-hnRNPAB)与对照组(SW480-NC、HT29-NC).采用RT-qPCR和Western blotting检测hnRNPAB及EMT相关指标(E-cadherin、N-cadherin及波形蛋白)mRNA和蛋白的表达水平,划痕实验检测细胞迁移能力,Transwell小室实验检测细胞侵袭能力,Western blotting检测Wnt/β-catenin信号通路关键蛋白WNT3A、WNT5A及β-catenin的表达水平.结果 与对照组(SW480-NC、HT29-NC)相比,实验组(SW480-hnRNPAB、HT29-hnRNPAB)hnRNPAB mRNA和蛋白表达水平明显增高,差异有统计学意义(P<0.01).实验组划痕愈合率明显高于对照组(SW480:19.6％±0.90％vs.2.23％±0.80％,P<0.01;HT29:40.30％±0.70％vs.6.40％±0.06％,P<0.01),穿膜细胞数明显多于对照组[SW480:(315.0±6.7)个vs.(62.0±4.3)个,P<0.01;HT29:(289.0±7.2)个vs.(54.0±5.2)个,P<0.01].与对照组相比,实验组上皮细胞标志物E-cadherin mRNA和蛋白表达水平明显降低,间质细胞标志物N-cadherin和波形蛋白mRNA和蛋白表达水平明显升高,差异有统计学意义(P<0.01).与对照组相比,实验组WNT3A、WNT5A和β-catenin蛋白表达水平明显增高,差异有统计学意义(P<0.01).结论 过表达hnRNPAB基因可诱导结直肠癌SW480和HT29细胞发生EMT,增强其迁移和侵袭能力,其机制可能与激活Wnt/β-catenin信号通路有关.