MGr1-Ag表达上调及下调的胃癌细胞株的建立及鉴定

摘要

为研究胃癌细胞耐药相关新基因MGr1-Ag对胃癌耐药细胞多药耐药性的调节作用及其机制.克隆MGr1-Ag的全长cDNA并构建其正反义真核表达载体,以脂质体介导法将正、反义真核表达载体分别转染入人胃癌细胞系MGC803与人胃癌多药耐药细胞系SGC7901/VCR中.结果显示,经RT-PCR扩增出大小约为1.0 kb的基因片段,成功克隆入pUCm-T载体,经DNA测序证实为MGr1-Ag基因.将其克隆入pCDNA3.1/V5-His后,经限制性核酸内切酶酶切鉴定,获得携有MGr1-Ag基因真核表达载体pCDNA3.1/V5-His-MGr1-Ag及其反义表达载体pCDNA3.1/V5-His-anMGr1-Ag.以脂质体介导法将MGr1-Ag的正、反义真核表达载体分别转染入MGC803与SGC7901/VCR中,经Western blot证实,成功建立了MGr1-Ag表达上调及下调的胃癌细胞株,为研究MGr1-Ag参与耐药的分子机制奠定了基础.