利用RNAi技术抑制ARPC2基因表达的研究

摘要

目的构建pSUPER-ARPC2表达载体,并在真核细胞中进行表达,验证ARPC2基因表达是否受到抑制.方法设计特异性针对ARPC2基因的寡核苷酸序列,退火后利用常规酶切、连接方法将其重组至pSUPER.basic载体中.对阳性克隆进行酶切和测序鉴定后,转染HEK 293细胞,利用RT-PCR和Western blot检测ARPC2基因的表达情况.结果构建的pSUPER-ARPC2载体导入HEK 293细胞时,ARPC2基因的表达受到抑制,蛋白合成减少.结论成功构建了ARPC2的RNAi表达载体,并证实其能对ARPC2基因的表达产生抑制作用,为进一步研究ARPC2的生理功能提供了重要的实验材料.