骨实质来源间质干细胞对博莱霉素诱导小鼠肺损伤的保护作用

摘要

目的 观察小鼠骨实质来源间质干细胞(M9Cs)对博莱霉素诱导的小鼠肺损伤的保护作用.方法 分离培养小鼠骨实质MSCs,通过流式细胞术和诱导分化培养,鉴定其免疫表型和分化潜能.56只雌性C57BL/6小鼠分为8组(每组7只):正常对照组,马利兰(BUS)组,博来霉素(BLM)组,马利兰+博来霉素(BLM+BUS)组,博来霉素+MSCs(BLM+MSCs)组,马利兰+博来霉素+MSC(BLM+BUS+MSCs)组;其中,BLM+MSCs组和BLM+BUS+MSCs组根据给予细胞数量不同再分为两个亚组:BLM+MSCs 1组(输注5×105个MSCs)和BLM+MSCs 2组(输注205X105个MsCs);BLM+BUS+MSCs 1组(输注5×105个MCSs)和BLM+BIJS+MSCs 2组(输注2.5×105个MSCs).细胞输注后14d处死小鼠,分析肺组织病理变化和羟脯氨酸含量.结果 小鼠骨实质MSCs为成纤维样细胞,免疫表型为Sca-1、CD44、CD29、CDl05阳性,CEB4、CIM5、CD11b、CD31阴性,在体外能够分化为脂肪细胞和成骨细胞.经静脉输注骨实质MSCs能够减轻博莱霉素诱导的小鼠肺损伤;在BLM+MSCs组,输注2.5×105 MSCs较5×105MSCs能更明显地改善肺损伤;BLM+BUS+MSCs组与BLM+MSCs组比较,肺组织病变明显减轻.正常对照组、BUS组、BLM组、BLM+BUS组、BLM+MSCsl组、BLM+MSCs 2组、BLM+BUS+MSCs 1组、BLM+BUs+MSCs 2组小鼠肺组织羟脯氨酸含量分别为0.72±0.05、0.79±0.10、1.37±0.09、1.22±0.16、1.24±0.14、1.01±0.15、1.03±0.19、0.88±0.12μg/mg.与正常对照组比较,BLM组和BLM+BUS组羟脯氨酸含量明显上升(P<0.01),BLM+MSCs组、BLM+BUS+MSCs组(MSCs输注组)分别与BLM组、BLM+BUS组(阳性对照组)相比,羟脯氨酸含量明显下降(P<0.01);而在BLM+BUS+MSCs组的肺组织羟脯氨酸含量均低于BLM+MSCs组(P<0.01).结论 小鼠骨实质MSCs具有间充质干细胞的特征;经静脉输注骨实质MSCs对博莱霉素诱导的小鼠肺损伤具有保护性作用;骨实质MSCs在肺内的作用与输注细胞数量有关;在博莱霉素诱导肺损伤后,马利兰与骨实质M9Cs共同作用有助于减轻肺泡炎和肺纤维化的程度.