晚期氧化蛋白产物诱导HaCaT细胞凋亡的实验研究

摘要

目的 探讨晚期氧化蛋白产物(AOPPs)对HaCaT细胞凋亡的影响及其可能的作用机制.方法 人血清白蛋白(HSA)与次氯酸钠溶液反应制成AOPPs.MTT法检测经不同浓度(0、50、100、200、400μg/ml)AOPPs处理24h后HaCaT细胞的活力,以选择AOPPs的工作浓度.根据时间效应或浓度效应对HaCaT细胞进行分组处理,流式细胞技术检测细胞凋亡率,二氯荧光素双醋酸盐(DCFH-DA)法检测细胞内活性氧(ROS)水平,Western blotting技术检测细胞内NOX4、Bax及Bcl-2蛋白的表达.结果 400μg/ml AOPPs作用后HaCaT细胞活力较其他浓度明显降低(p＜o.05).随AOPPs作用时间的延长和浓度的增加,HaCaT细胞凋亡率明显增加(P＜0.05),细胞内ROS产生增多(P＜0.05),NOX4和Bax蛋白表达量增加(P＜0.05),Bcl-2蛋白表达量降低(P＜0.05).结论 AOPPs可能通过NADPH氧化酶途径诱导HaCaT细胞凋亡.