CaSR在宫颈癌C-33A细胞增殖和迁移中的作用研究

摘要

目的:观察钙敏感受体(calcium sensing receptor,CaSR)在宫颈癌C-33A细胞中的表达情况并分析其参与细胞增殖和迁移的机制.方法:30只裸鼠随机分为Model(移植瘤模型)组、Model+R568(CaSR激动剂)组、Model+Calhex231(CaSR抑制剂)组,每组10只.C-33A细胞分为Control组、R568组和Calhex231组.分析各组移植瘤体积和抑瘤率变化;ELISA检测裸鼠血清和C-33A细胞培养基中MMP2和MMP9含量变化;Western blot测定瘤组织和细胞中CaSR、Bax、Bcl-2、E-cadherin、β-catenin和VEGFR3表达变化;CCK8检测C-33A细胞增殖情况;细胞划痕实验检测C-33A细胞迁移;qRT-PCR检测Bcl-2和Bax基因表达情况.结果:30 d后取各组裸鼠瘤组织称重,Model+R568组的移植瘤瘤重低于Model组(P<0.05).饲养5、10、15、20、25、30 d,测量移植瘤体积,与Model组比较,Model+R568组显著抑制肿瘤生长而Model+Calhex231肿瘤体积显著增加(P<0.05).与Model组比较,Model+R568组裸鼠血清中MMP2和MMP9含量均显著降低(P<0.05).Western blot结果显示,与Model组比较,Model+R568组的CaSR和E-cadherin蛋白表达均显著增加而Bcl-2的表达量显著减少(P<0.05).细胞实验中,与Control组比较,R568组C-33A细胞增殖和迁移速度均显著降低(P<0.05),CaSR、Bax、E-cadherin和β-catenin表达均显著上调,而Bcl-2和VEGFR3表达均下调(P<0.05),不同时间点细胞内Ca2+荧光强度显著增强(P<0.05),培养基中MMP2和MMP9含量水平均显著下降(P<0.05),Bax基因表达明显上调而Bcl-2表达下调(P<0.05).在Calhex231组上述结果均相反.结论:CaSR激活能够抑制C-33A细胞增殖和迁移,并促进其凋亡.