NLRP3介导线粒体损伤在非酒精性脂肪性肝炎中的作用及SS-31的干预研究

摘要

目的:探讨NLRP3炎性小体介导线粒体损伤在非酒精性脂肪性肝炎(NASH)中的作用机制及线粒体靶向抗氧化肽SS-31的干预效果.方法:选择健康8周龄雄性C57BL/6J小鼠共30只,按随机数字表法分为对照组、模型组和干预组,每组10只.对照组正常饮食喂养,模型组和干预组采用胆碱-蛋氨酸缺乏(MCD)饲料喂养.干预组腹腔注射SS-313 mg/kg,1次/周,模型组注射等量0.9％氯化钠溶液,共持续喂养8周.观察各组体重、血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)含量;HE染色观察肝脏组织病理变化;实时定量PCR(RT-PCR)法检测肝脏线粒体损伤指标,包括ATPase-6和细胞色素C基因表达量;改良氧电极法测定线粒体呼吸控制率(RCR)与线粒体琥珀酸脱氢酶(SDH)活性;免疫组化染色检测肝脏NLRP3表达量;Western blot法检测肝脏Caspase-1、白介素(IL)-1β和IL-18表达水平.结果:三组均成功喂养8周,无死亡.模型组ATPase-6和细胞色素C基因表达量均明显高于对照组(P<0.05).干预组ATPase-6和细胞色素C基因表达量均低于模型组(P<0.05).模型组线粒体RCR高于对照组,而SDH活性低于对照组(P<0.05).干预组线粒体RCR低于模型组,而SDH活性高于模型组(P<0.05).模型组NLRP3阳性表达量高于对照组(P<0.05).干预组NLRP3阳性表达量低于模型组(P<0.05).模型组Caspase-1、IL-1β和IL-18表达水平均高于对照组(P<0.05).干预组Caspase-1、IL-1β和IL-18表达水平均低于模型组(P<0.05).结论:NLRP3炎性小体介导线粒体损伤参与了NASH的发病过程,线粒体靶向抗氧化肽SS-31可降低NASH肝脏NLRP3表达,改善线粒体损伤程度.