叉头框蛋白O3a表达下调对人肾小管上皮细胞EMT的影响

摘要

目的:研究叉头框蛋白O3a (forkhead box protein O3a,FoxO3a)下调对人肾小管上皮细胞(HK-2)上皮-间质转化(EMT)的影响和机制.方法:体外培养HK-2细胞,10 ng/mL TGF-β 1诱导HK-2细胞建立EMT细胞模型,Western blot检测E-cadherin、α-SMA表达,证明细胞EMT模型建立成功.Western blot检测在EMT细胞和正常细胞中转录因子FoxO3a的表达变化.敲低正常HK-2细胞中的FoxO3a后,Western blot检测细胞的EMT程度.Western blot检测EMT细胞与低表达FoxO3a细胞中β-Catenin的表达变化.结果:TGF-β 1处理HK-2细胞作用后E-cadherin表达量显著减少(P＜0.01),α-SMA蛋白表达量明显增加(P＜0.05),证明EMT细胞模型建立成功.与正常HK-2细胞相比,EMT细胞中转录因子FoxO3a显著减少(P＜0.01).敲低HK-2细胞中的FoxO3a后,E-cadherin表达量显著减少(P＜0.01),α-SMA蛋白表达量明显增加(P＜0.05),出现EMT现象.相比于正常细胞,EMT细胞的β-Catenin表达增加(P＜0.05);FoxO3a敲低的细胞中β-Catenin表达也显著增加(P＜0.01).结论:HK-2细胞通过降低转录因子FoxO3a的表达,从而上调β-Catenin,促进细胞上皮-间质转分化.