橡胶延伸因子基因及3'端非编码区的克隆与序列分析

摘要

橡胶延伸因子REF(Rubber Elongation Factor)是橡胶生物合成中最重要的酶之一.作者利用REF基因序列设计并合成引物.通过提取胶乳总RNA用RT法合成cDNA后,通过PCR技术扩增并克隆了REF基因和3端非编码区.序列测定结果表明,REF基因全长414个碱基,编码138个氨基酸,3＇端非编码区长112bp.与GoyvaertsE等人发表的序列比较:REF基因同源率为100%,3＇端非编码区有2bp的差异,同源率为98%.将所克隆的REF基因及3＇非编码区进行地高辛标记,对胶乳和叶片总RNA进行点杂交分析,结果表明,胶乳总RNA呈阳性反应,叶片总RNA则呈阴性反应.