桑树橡胶延伸因子基因克隆与表达分析

摘要

乳汁是桑树的主要特征之一,桑树富含乳汁,乳汁在桑树的生长和防御上起重要作用,桑树乳汁中的糖甘酶抑制剂还是抗糖尿病的有效成分。在桑树cDNA文库中,通过序列比对发现一段与乳汁合成相关的基因片段,通过RACE的方法获得该基因的全长序列,并把该基因命名为桑树橡胶延伸因子基因。该基因cDNA全长1145bp,编码区759bp,编码252个氨基酸残基。为初步验证该基因功能,通过RT-PCR的方法分析桑树橡胶延伸因子基因在桑树不同组织器官的表达,结果表明该基因在桑树幼叶中表达量最高,其次是茎和芽,在根中的表达量最低。对桑树叶片进行细胞分裂素处理,发现细胞分裂素处理后桑树橡胶延伸因子基因表达量有减少的趋势,在细胞分裂素处理的叶片中,正在伸展的幼叶中表达量要高于刚出现的幼叶和成熟叶。与桑树中其它功能基因相比,桑树橡胶延伸因子在桑树正常生长中的表达量远高于桑树Na+/H+逆向转运蛋白基因MaNHX和桑树低温诱导蛋白基因WAP27的表达量。以上结果表明桑树橡胶延伸因子的表达不完全对应于生长旺盛部位,可能对应于桑树相关结构的形成;相对于其它功能基因,其在桑树的正常生长发育中起重要作用。