酵母双杂交筛选与甲状旁腺素1型受体相互作用的蛋白

摘要

目的:采用Clontech公司第3套酵母双杂交系统,筛选与甲状旁腺素1型受体(PTH1R)相互作用的蛋白.方法:将全长PTH1R基因克隆到载体pGBKT7作为诱饵,用LiAc介导将诱饵蛋白质粒pGBKT7-PTH1R和人肾cDNA文库质粒转化到酵母菌AH109中,检测Mell报告基因的表达,并进行相互作用的验证.结果:测序和相互作用验证结果表明SNAPIN在酵母系统中能特异地与PTHH1R相互作用;根据对SNAPIN基因的功能分析,其可能与细胞内钙稳态的调控有关.结论:为进一步研究PTH1R促进骨肉瘤进展的机制提供了一定的线索.