重组抗CD52人源化单克隆抗体ELISA检测方法的建立

摘要

目的:建立一种灵敏、特异、快速的ELISA方法,用于检测食蟹猴血清中重组抗CD52单克隆抗体的含量.方法:采用双抗夹心ELISA法对重组抗CD52单克隆抗体进行定量.以猴血清吸附的羊抗人IgG作为包被抗体,稀释的猴血清吸附的羊抗人IgG-HRP(二抗)作为检测抗体,加入底物显色剂后在酶标仪上读取D450nm值.结果:建立并确证了检测重组抗CD52单克隆抗体的ELISA方法,方法的线性范围为7.81～500 ng/mL,定量下限为7.81 ng/mL,板内及板间精密度和准确度均在±15％以内,室温、冻融、稀释效应稳定性良好.结论:方法学验证表明ELISA法测定食蟹猴血清中重组抗CD52单克隆抗体浓度的特异性、精密度和准确度均满足新生物制药临床前药代动力学研究指导原则要求,可用于重组抗CD52单克隆抗体的检测.