蛇毒蛋白triflin功能区TFPR1在大肠杆菌中的表达及其功能初步研究

摘要

目的:获得具有生物学活性的蛇毒蛋白triflin的致病相关蛋白1(PR-1)功能区TFPR1.方法:分析triflin空间结构及其保守结构域,获得TFPR1序列,并进行密码子优化、全基因合成,构建原核表达质粒pET-TFPR1,在大肠杆菌BL21中以IPTG诱导表达,表达产物经Western印迹鉴定后,镍柱纯化、复性,对复性后的产物进行特性分析;以复性的TFPR1肌肉途径接种BALB/c雌性小鼠,分析其生物学活性.结果:TFPR1以包涵体形式表达,复性后蛋白纯度大于95％,无需佐剂免疫小鼠即可诱导机体产生效价为20万的抗TFPR1抗体.结论:制备了具有生物学活性的重组蛋白TFPR1,为后续研究TFPR1的生物学功能奠定了物质基础.