一种石蜡包埋组织DNA提取方法

摘要

@@ 从石蜡包埋组织中提取基因组DNA有一定的难度.Moerkerk证明福尔马林固定对DNA有降解作用[1].传统的二甲苯脱蜡及苯酚氯仿抽提DNA,其弊端是过程长、对人有毒、得到的DNA量仅1～2 ng.如何避免DNA分子损失,保持DNA相对完整和纯度值得探讨?本人经过5年摸索,建立了一种简便有效的石蜡包埋组织DNA的提取方法.其基本原理是:用蛋白酶K及SDS、Triton X-100在Tris、EDTA保护DNA的条件下,裂解细胞、消化蛋白质,使核蛋白解聚并使细胞内本身存在的DNA酶灭活,然后用NaI沉淀DNA,玻璃粉吸附DNA,离心去除杂质以及乙醇洗涤得到5～10 μg DNA.具体操作如下: