SD大鼠超排卯及胚胎冷冻方法比较

摘要

目的 优化超排卵效果及建立大鼠胚胎冷冻方法.方法 腹腔注射三种不同剂量PMSGHCG(15 IU/只、20 IU/只、25 IU/只)超排5周龄SD大鼠,当日与正常雄鼠1:1合笼交配,比较三种激素剂量的超排卵效果.应用输卵管吹卵法收集2-细胞胚胎,采用小鼠胚胎冷冻方法对大鼠胚胎进行冷冻,通过胚胎复苏率比较不同冷冻时间(方法Ⅰ:5min,方法Ⅱ:1 min)的冷冻效果.结果 采用三种剂量进行超排分别获得13±12.7、31±14.2、41±25.4枚胚胎,其中激素剂量25 IU/只超排效果最好;方法Ⅱ在操作简便性上明显优于方法Ⅰ,但冷冻效果无显著性差异(平均复苏率88.3%与85.0%).采用方法Ⅱ冻存大鼠胚胎总计152枚,复苏后形态正常胚胎共计139枚(91.44%),培养20min后,对存活胚胎共计105枚(75.53%)进行胚胎移植,产仔39只(37.14%).结论 成功优化大鼠超排及建立大鼠胚胎冷冻方法.