Trp53基因剔除小鼠的制备及其在药物致癌性评价中的应用

摘要

目的 建立Trp53基因剔除小鼠模型.方法 本研究拟通过基因工程技术建立Trp53基因剔除小鼠模型,通过RT-PCR、Western-blot等技术检测野生型、杂合子、纯合子小鼠中Ttp53基因的表达;观察三种基因型小鼠自发肿瘤情况并进行病理分析;以N-甲基亚硝基脲(MNU)为致癌剂,探索该模型用于药物致癌性评价的可行性.结果 DNA、RNA及蛋白水平的研究证实,已成功获得Trp53基因剔除小鼠模型.初步的表型分析显示:Trp53基因纯合缺失小鼠自出生13周起陆续发生肿瘤,至36周时所有观察纯合小鼠均死于肿瘤,以恶性胸腺淋巴瘤为主(60％).与野生型小鼠相比,基因杂合缺失小鼠对致癌剂的敏感性显著提升,杂合小鼠经75 mg/kg体重的N-甲基亚硝基脲(MNU)诱导,90％的小鼠发生肿瘤,其中86％为恶性胸腺淋巴瘤,而野生小鼠经药物诱导后只有60％发生肿瘤.腹腔注射枸橼酸缓冲液的80只对照组小鼠均未观察到肿瘤的发生.结论 这一模型的建立为Trp53基因功能研究和药物致癌性评价提供了理想的动物模型.