miR-330-3p靶向CDK1调控胃癌细胞增殖、转移和上皮间质转化

摘要

目的 研究微小RNA-330-3p(miR-330-3p)通过靶向细胞周期蛋白依赖性激酶1(CDK1)抑制胃癌细胞增殖、转移和上皮间质转化(EMT).方法 采用TargetScan7.1预测软件及双荧光素酶报道基因试验检测miR-330-3p对CDK1基因的靶向调控作用.收集胃癌组织和其配对的癌旁组织各50例,采用RT-PCR检测miR-330-3p和CDK1 mRNA分别在胃癌组织和其配对的癌旁组织中的表达水平.采用Pearson分析miR-330-3p与CDK1在胃癌组织中表达的相关性.常规培养胃癌细胞MKN1,分为对照组(NC)、miR-330-3p mimic组和miR-330-3p mimic+ oe-CDK1组,采用lip2000进行各组细胞的转染.MTS实验检测各组细胞的增殖能力,Transwell实验检测各组细胞的转移能力.采用Western blot检测各组细胞中CDK1、EMT相关蛋白和β-catenin的表达.结果 Targetscan7.1预测软件及双荧光素酶报道基因试验证实CDK1为miR-330-3p的靶基因.胃组织中miR-330-3p的表达下调、CDK1表达上调,且两者表达呈负相关性(P＜0.05).与NC组相比,miR-330-3p mimic组和miR-330-3p mimic+ oe-CDK1组胃癌细胞增殖和转移能力降低;而与miR-330-3p mimic组相比,miR-330-3p mimic+ oe-CDK1组胃癌细胞增殖和转移能力增加,CDK1减弱miR-330-3p对胃癌细胞增殖和转移能力的抑制作用.与NC组相比,miR-330-3p mimic组和miR-330-3p mimic+ oe-CDK1组细胞中CDK1、N-cadherin、vimentin和β-catenin表达降低,E-cadherin表达增加;而与miR-330-3p mimic组相比,miR-330-3p mimic+ oe-CDK1组CDK1、N-cadherin、vimentin和β-catenin蛋白表达增加,E-cadherin表达降低.CDK1减弱miR-330-3p对EMT和β-catenin的抑制作用.结论 miR-330-3p靶向调控CDK1的表达可抑制胃癌细胞的增殖、转移和EMT.