Candida cloacae源脂肪酸醇氧化酶基因的植物表达质粒构建及农杆菌转化研究

摘要

目的构建表达Candidacloacae源脂肪酸醇氧化酶基因的植物表达质粒及对农杆菌转化。方法脂肪酸醇氧化酶基因经RT-PCR扩增后直接克隆pET-17b载体,双酶切目的片断和植物表达载体,以T4连接酶将目的片断与载体相连接,电转化方式将重组质粒转入农杆菌。结果成功地将目的基因定向克隆到表达载体,并转入到农杆菌中。结论pET-17b载体可直接进行PCR扩增产物克隆;大分子量质粒(>12kb)可通过电转化方式有效导入农杆菌中。