微小RNA-873-5p通过靶向作用于PYGO2基因对膀胱癌细胞生长的影响

摘要

目的 探讨微小-873-5p(miR-873-5p)转染对PYGO2基因表达的调控作用及对膀胱癌细胞5637生长的影响.方法 根据处理不同,膀胱癌细胞分为对照组(转染miR-NC)和实验组(转染miR-873-5p).qRT-PCR检测转染后两组细胞中miR-873-5p表达量.生物信息学预测PYGO2为miR-873-5p可能的靶基因.qRT-PCR检测PYGO2mRNA的表达.构建PYGO2基因的3'UTR野生型及突变型序列双荧光素酶报告基因载体并进行荧光素酶活性检测.Western blot检测PYGO2及下游靶蛋白的表达.流式细胞术分析细胞周期分布,MTS法和集落形成实验分析细胞活力和增殖能力.结果 实验组中miR-873-5p表达量显著上升(P＜0.01).双荧光素酶报告基因系统结果显示PYGO2是miR-873-5p的靶基因.与对照组相比,实验组细胞中PYGO2 mRNA水平下调58.48％ (P＜0.01).PYGO2及下游靶蛋白表达明显下调.转染miR-873-5p后,细胞周期被阻滞在G0/G1期(P＜0.01),实验组细胞的活力和增殖能力均明显降低(P＜0.05).结论 miR-873-5p通过干扰膀胱癌细胞5637中PYGO2基因的表达,阻滞细胞周期进展,抑制细胞的增殖,可能成为膀胱癌基因治疗的靶标分子.