萝卜硫素对HER2 CAR-T细胞分化、细胞内因子分泌及抗肿瘤作用的影响

摘要

目的:探讨萝卜硫素(SFN)对靶向人类表皮生长因子受体-2(HER2)的嵌合抗原受体修饰T细胞(CAR-T)分化、细胞内因子分泌、抗肿瘤能力的影响.方法:采用密度梯度离心法及细胞免疫磁珠分选健康供者外周血CD8+T细胞,制备HER2 CAR-T细胞,用15μmol/L SFN处理72 h后检测其分化情况.将HER2 CAR-T细胞与A549共孵育,检测HER2 CAR-T细胞内IFN-γ和TNF-α的表达及A549细胞的凋亡,采用qRT-PCR检测细胞糖酵解途径相关酶[己糖激酶2(HK2)、磷酸果糖激酶(PFKM,PFKP)、丙酮酸激酶(PKM)]及脂肪酸氧化过程相关酶[肉毒碱棕榈酰基转移酶(CPT1A)]mRNA的表达.以未经SFN处理的细胞作为对照.结果:与对照组相比,SFN组中心记忆性T细胞亚群比例增加(P<0.05),IFN-γ及TNF-α分泌水平增加,对A549细胞的杀伤能力增强(P<0.05),HK2、PFKM、PFKP和PKM mRNA表达下调,CPT1A mRNA表达上调(P<0.05).结论:SFN通过抑制糖酵解途径促进HER2 CAR-T细胞向记忆亚群分化,同时增强其抗肿瘤效应.