复制缺陷的重组腺病毒经心包腔转染急性心肌梗死猪观察

摘要

目的:评价重组腺病毒经心包腔转染的效率及持续时间.方法:应用磷酸钙沉淀方法制备携带大肠杆菌LacZ基因复制缺陷的重组腺病毒(Ad-LacZ).12头中国小型猪随机等分为实验组和对照组,采用球囊堵塞前降支第一对角支远端,心肌梗死模型建立后即刻采用经皮剑突下穿刺中心静脉导管心包腔内注射转染,28 d后处死.实验组胶原酶1 200 u及透明质酸酶3 000 u预处理心包后,在心包腔内注射Ad-LacZ基因2.0×109噬斑集落形成单位;对照组:同样方法预处理心包后,在心包腔内注射生理盐水1 ml.于注射后3 d、7 d及28 d分别对缺血心肌进行HE、HBFP及X-gal染色.结果:冠状动脉造影证实前降支远端完全闭塞,病理学检查显示心肌有缺血和梗死.实验组注射Ad-LacZ基因后第3 d、7 d及28 d后X-gal染色有阳性细胞,以7 d最明显,对照组28 d内均未发现阳性细胞.结论:应用球囊堵塞法可成功建立猪急性心肌梗死模型,胶原酶及透明质酸酶预处理心包后,腺病毒载体可转染缺血心肌,并持续表达4周.