CTAB法提取苏铁基因组DNA的条件优化

摘要

采用单因素梯度试验结合正交实验的方法(CTAB法),优化了苏铁类植物全基因组DNA提取工艺.研究表明:材料量对提取DNA的浓度、提取率和纯度的影响最为明显,但还没有达到显著水平;最佳工艺参数为:20 mg苏铁羽片,65℃水浴处理30 min,抽提后,加入800μL无水乙醇和5μL饱和NaCl溶液,6000 r/min离心4 min沉淀DNA;溶解再沉淀后的DNA,质量浓度可达0.2413 g/L,提取率可达0.483%,│OD260/OD280-1.8│<0.01,可以满足RAPD-PCR分子标记技术应用.