长双歧杆菌F16菌株胆盐水解酶基因的鉴定及产酶条件优化

摘要

在前期益生性实验过程中,驯化后的长双歧杆菌F16菌株具有显著的降胆固醇作用,对人体健康具有重要意义。为探讨其降解机制,实验测定了其产胆盐水解酶(Bile salt hydrolase,BSH)能力并鉴定了胆盐水解酶基因。为提高F16菌株的降胆固醇效果,在单因素实验的基础上,利用Box-Behnken中心组合原理设计3因素3水平响应面实验,以葡萄糖质量浓度、蛋白胨质量浓度和接种量为自变量,BSH活性OD_(570)为响应值,确定了F16菌株产BSH的优化发酵条件:葡萄糖质量浓度为10.05 g/L、蛋白胨质量浓度为15 g/L、接种量为1.05%(OD_(600)为1),既定条件下BSH活性OD_(570)可达到0.896,酶活可达到优化前的1.8倍。对F16菌株降解胆固醇的降解率进行了测定,优化后在48 h内的胆固醇降解率可达到72.6%,约为优化前的1.6倍。实验结果表明F16菌株的益生性能在食品、保健和医药等领域具有潜在的应用前景。