人胸腺素α1基因工程菌的构建与表达

摘要

胸腺素α1(Thymosin alpha 1,Tα1)是一种针对T淋巴细胞的免疫增强剂,临床用途广泛.为大量制备Tα1,按大肠杆菌惯用密码子合成编码Tα1的基因,克隆于pUCmT,转化E.coli JF1125,经测序证明序列正确后,克隆入pET39(b)的BspT I和BamH I位点,成功地构建出包含信号肽,DsbA,连接肽,6个His,EKsite(Asp-Asp-Asp-Asp-Lys),胸腺素α1的表达载体,转化E.coliBL21(DE3),获得胸腺素α1基因工程菌.SDS-PAGE分析表明,经0.1 mmol/L IPTG和30℃诱导8 h,在大肠杆菌周质中大量表达表观分子量31 kD左右的融合蛋白.为进一步获得大量可供实验研究和临床应用的重组胸腺素α1创造条件.