人α1胸腺素基因克隆及表达载体的构建

摘要

目的：为人α1胸腺素基因的蛋白质表达奠定基础。方法：用Trizol法提取人α1胸腺素RNA反转录成CD17NA,以已知胸腺素基因为模板,在编码区上游和下游分别设计合成一对含有EcoRI和BamHI酶切位点的寡聚核甘引物扩增Tα1克隆到PUC19载体中,双酶切后回收连接到表达大肠杆菌DH25中表达。以碱裂解法提取重组质粒双脱氧链法序列测定。结果：成功构建了Tα1克隆重组体PUC19-Tα1,经序列分析证实对码序列无误。结论：Tα1在DH25中表达成功。