腺相关病毒载体的杆状病毒生产系统的构建

摘要

由于腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)的非致病性及能感染多种组织类型,重组AAV载体(rAAV)在基因治疗领域备受关注.然而,如何高效生产rAAV以适应临床上对其高产量的需求一直是限制其应用的瓶颈.借助杆状病毒携带rAAV包装所需组分,通过感染昆虫细胞来生产rAAV是一种能够解决其产量瓶颈的生产方式.将AAV2的Rep、Cap基因序列以及含AAV2 ITR及EGFP表达框的序列分别构建到三个杆状病毒中,通过共感染Sf9细胞来生产rAAV,结果显示成功包装出rAAV病毒,且病毒活力较好.这种生产方式很容易放大,将为AAV载体产业化及临床应用奠定基础.