响应面法优化重组枯草芽孢杆菌发酵生产青霉素G酰化酶

摘要

利用响应面法优化重组枯草芽孢杆菌pAUB-BmPGA/BS168发酵生产青霉素G酰化酶的条件。通过Plackett-Burman设计法对碳源﹑氮源﹑无机盐﹑温度等19个因素对发酵产青霉素G酰化酶的影响进行评价。筛选出发酵温度和酵母膏为影响产酶的显著因素。采用了中心组合设计实验对两种显著影响因素进行了优化,应用响应面分析确定了显著因素的最佳水平。结果表明,当温度为34℃,酵母膏为8.8g/L时,最终的酶活达到28.2U/mL,比初始发酵条件提高了1.19倍。在最佳条件利用15L的发酵罐对重组枯草芽孢杆菌进行扩大培养,最终酶活可达51.0U/mL,相对于摇瓶发酵又有大幅度的提高。