响应面法优化重组枯草芽孢杆菌生产纤维素酶EGA的研究

摘要

通过响应面优化法(response surface methodology,RSM)对分泌表达纤维素酶EGA重组枯草芽孢杆菌的发酵条件进行优化.利用Plackett-Burman实验设计对淀粉、酵母粉、蛋白胨等8个因素对枯草芽孢杆菌产纤维素酶EGA的显著影响与否进行评估分析,筛选得到淀粉、酵母粉和MgSO4·7H2O为3个显著影响的因素,再利用Box-Behnken实验设计对这3个因素进行进一步优化,确定最佳培养基的配比为淀粉21 g/L,酵母粉11.26 g/L,蛋白胨25 g/L,MgSO4·7H2O 1.52 g/L,KH2PO4 0.395 g/L,NaCl 3.25 g/L,CaCl2 0.1 g/L,FeSO4·7H2O 0.005 g/L.在最优条件下,利用小型发酵罐对重组菌进行扩大培养,其最高酶活力达到1 264 U/L.