大黄素对重症急性胰腺炎大鼠肺损伤的保护作用及对MAPK通路的影响

摘要

[目的]观察大黄素对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)大鼠肺损伤的保护作用,并初步探究其作用机制.[方法]将80只无特定病原体(specific pathogen free,SPF)级SD大鼠随机分为对照组、模型组、大黄素高剂量组和大黄素低剂量组,每组20只.除对照组外,其余组大鼠均使用牛磺脱氧胆酸钠建立SAP大鼠模型,动物苏醒后1h及6h,大黄素高、低剂量组大鼠分别给予60mg·kg-1和30mg·kg-1的大黄素灌胃,对照组和模型组大鼠以等量0.5％羧甲基纤维素钠(carboxymethylcellulose sodium,CMC-Na)灌胃.造模12h后检测大鼠肺组织湿干重比(wet-to-dry weight ratio,W/D)、动脉血氧分压(partial pressure of oxygen,PaO2)、二氧化碳分压(partial pressure of carbon dioxide,PaCO2)、氧合指数(oxygenation index,OI);苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色检测肺组织病理变化;酶联免疫吸附检测(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)试剂盒检测血清脂肪酶、淀粉酶、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)含量、肺组织超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活力和丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量;实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测肺组织B淋巴细胞瘤-2基因(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bcl-2-associated X protein gene,Bax)mRNA表达水平;Western blot检测肺组织Bcl-2、Bax蛋白表达水平和p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase,p38 MAPK)、细胞外信号调节激酶(extracellular signal-regulated kinase 1/2,ERK1/2)、c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)蛋白磷酸化水平.[结果]与对照组比较,模型组W/D和PaCO2升高,PaO2和OI降低,血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6、MDA含量升高,SOD活力降低,肺组织充血、水肿,有大量炎症细胞浸润,Bcl-2 mRNA和蛋白表达降低,BaxmRNA和蛋白表达增加,p38 MAPK、ERK1/2、JNK蛋白磷酸化水平增加.与模型组比较,大黄素可降低W/D和PaCO2,增加PaO2和OI,降低血清脂肪酶、淀粉酶、TNF-α、IL-6、MDA含量,提高SOD活力,改善肺组织肺损伤,提高Bcl-2 mRNA和蛋白表达,减少Bax mRNA和蛋白表达,降低p38 MAPK、ERK1/2、JNK蛋白磷酸化水平,其中高剂量大黄素的作用优于低剂量.上述指标差异均有统计学意义(P<0.05).[结论]大黄素对SAP大鼠肺损伤具有保护作用,其作用机制可能与抑制MAPK信号通路的关键蛋白活化有关.