兼性固CO2、N2菌BHJ的分子生物学鉴定及r生长条件的确定

摘要

"温室效应"日趋严重,生物固碳特别是微生物固碳将发挥独特的作用.CO2、N2是温室气体主要贡献者.目的:研究对一种命名为BHJ的兼性固CO2、N2菌(能同时固定CO2和N2)进行分子生物学鉴定及生长条件确定.方法:用细菌基因组DNA提取试剂盒提取兼性固CO2、N2菌BHJ总DNA,再用PCR试剂盒对其16SrDNA进行扩增,最后把16SrDNA测序后序列在Geneank比对进行分子生物学鉴定;用无碳、氮培养基(配方:KH2PO40.2g,CaCl20.2g,NaCl0.2g,MgSO40.3g,VB0.0625g,微量元素溶液0.5ml,蒸馏水:1000ml)进行单一变量培养,通过分光光度计测其OD值变化确定兼性固CO2、N2菌BHJ的最佳温度、CO2和N2浓度比、pH.兼性固CO2、N2菌BHJ的16SrD-NA序列与在Genebank登记的Burkholderiacepacia的16SrDNA序列的同源性达到99％以上,结果:最佳生长温度为28℃,最佳生长CO2和N2浓度比为1:99,最佳生长pH7～9.