猪原环病毒2型衣壳蛋白含量与抗原滴度的相关性研究

摘要

将猪圆环病毒2型衣壳蛋白原核表达工程菌用PBS溶解破碎后,经2次50％饱和度硫酸铵沉淀,用Brodford法分别测定不同稀释度的原核表达菌破菌液中的蛋白含量,同时进行琼脂双向免疫扩散试验(AGP),48h观察免疫沉淀线,以出现免疫沉淀线的表达产物最高稀释倍数为该抗原的滴度,并由此探讨猪圆环病毒2型衣壳蛋白(PCV2-CAP)原核表达产物中总蛋白含量与抗原滴度之间的相关关系.结果表明,AGP最小检出值为0.255mg(蛋白)／ml,表达产物总蛋白含量在0.255～0.857mg/ml与以0.5为底的AGP滴度的对数成正相关关系(R2=0.9938).当总蛋白含量超过0.857mg/ml时抗原滴度变化不再相关联.可见,AGP能检出表达产物中总蛋白的最低值为0.255mg/ml,最高值为0.857mg/ml,在此区间内蛋白含量与AGP滴度成正相关关系,可以通过测定蛋白含量估算抗原滴度.