长链非编码RNA uc.412介导转化生长因子-β1诱导的系膜细胞自噬的机制研究

摘要

目的探究长链非编码RNA uc.412(long non-coding RNA uc.412,LncRNA uc.412)在转化生长因子-β1(transforming growth factor,TGF-β1)诱导的系膜细胞自唾中的作用及相关机制。方法用TGF-β1(10 μg/L)干预大鼠系膜细胞,Western blot法检测自唾标志物LC3、p62的蛋白表达,Real-time PCR法检测LncRNA uc.412的表达;采用LncRNA uc.412过表达慢病毒转染系膜细胞并用Real-lime PCR法检测转染效率,分别采用Western blot法和Real-time PCR法检测LC3和p62在蛋白水平和mRNA水平表达变化;用TGF-pi(10 μg/L)和Smad3特异性磷酸化抑制剂SIS3(1 μmol)干预系膜细胞,Western blot法检测PSmad3的蛋白表达,Real-time PCR法检测LncRNA uc.412的表达。结果与对照组相比,TGF-β1组LC3 Ⅱ/Ⅰ、p62表达上调(P<0.05),LncRNA uc.412表达增加(P<0.05);过表达LncRNA uc.412组LC3和p62在蛋白和mRNA水平高于对照组和病毒空载组(P<0.05);与对照组相比,TGF-β1组pSmad3蛋白和LncRNA UC.412表达上调(P<0.05);与TGF-β1组相比,TGF-β1+SIS3组pSmad3蛋白和LncRNA uc.412表达下降(P<0.05)。结论LncRNA uc.412可能作为TGF-β1/Smad3通路的下游效应分子促进系膜细胞自噬,并且为慢性肾脏病的诊治提供新的思路。