透射电镜样本制备过程中前处理溶液温度对心肌细胞超微结构的影响

摘要

目的观察透射电镜样本制备过程中前处理溶液温度对心肌细胞超微结构的影响,以确定最佳实验温度。方法将15只健康C57/BL6小鼠随机分成3组,每组5只。腹腔麻醉后分别切取小鼠心肌组织,行透射电镜生物样本常规制备程序,Ⅰ组样本漂洗、后固定和脱水程序均在4℃进行,组在20℃进行,Ⅲ组在37℃进行。结果透射电镜镜下观察显示,Ⅰ组肌丝、线粒体、肌膜下小泡及Z线的超微结构保存较好,样本背景清晰整洁;Ⅱ组肌丝整齐,线粒体和肌膜下小泡少部分膜结构溶解,Z线附着少量黑颗粒,结构间隙有黑颗粒污染;Ⅲ组结构保存较差,肌丝模糊,线粒体部分膜结构溶解,肌膜下小泡膜结构溶解且结构不清晰,Z线附着黑颗粒,结构间隙黑颗粒污染严重。结论透射电镜样本制备过程中心肌细胞超微结构的保存受前处理溶液温度的影响,最佳实验温度为4℃。