基因重组Taq DNA聚合酶的制备

摘要

目的 制备重组Taq DNA聚合酶,为PCR提供试剂.方法 用Taq DNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E.coli菌株,异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导12 h表达Taq DNA聚合酶,溶菌酶、NP40裂解细菌,硫酸铵沉淀、4 ℃透析,SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)和PCR扩增分析其纯度和活性.结果 分离纯化制备的Taq酶,纯度、活性都可与同类产品相比,能有效扩增DNA 片段.结论 该方法制备可用于PCR的Taq酶具有快速简便的优点.