2种制备Taq DNA聚合酶方法的比较

摘要

目的 比较2种制备纯化Taq DNA聚合酶的方法,为PCR提供实验用酶.方法 Taq DNA聚合酶基因的pTaq表达质粒转化E.coli菌株,IPTG诱导12 h后收集菌体,分别用硫酸铵沉淀法和冻融法进行纯化,SDS-PAGE电泳和PCR扩增分析比较其纯度和活性.结果 硫酸铵沉淀法制备的Taq DNA聚合酶活性能可有效扩增DNA 片段;冻融法制备的Taq DNA聚合酶活性较低.结论 硫酸铵沉淀法制备的Taq DNA聚合酶优于冻融法,能够达到分子生物学实验中基因扩增的要求.