两种巨噬细胞外泌体制备方法的对比研究

摘要

目的 分析比较超速离心法、聚合物沉淀法提取巨噬细胞外泌体的质量及效率。方法 分别采取超速离心法、聚合物沉淀法提取巨噬细胞外泌体,Western blot鉴定外泌体标志蛋白,通过透射电镜对比外泌体结构、大小,以及两种提取方法的时间成本、设备成本和外泌体的浓度。结果 透射电镜下两种提取方法提取的外泌体均显示圆盘状结构,膜结构完整,轮廓清晰。Western blot检测两种提取方法提取的外泌体标志蛋白Alix、TSG101和CD63表达均无差异。聚合物沉淀法提取的外泌体大小为(120.757±5.558)nm,高于超速离心法提取的外泌体大小(100.257±6.882)nm,差异有统计学意义(P<0.05)。聚合物沉淀法外泌体的结构完整度为(95.714±3.450)%,高于超速离心法提取的外泌体,差异有统计学意义(P<0.05)。聚合物沉淀法提取的外泌体浓度为(144.529±6.860)μg/mL,超速离心法提取的外泌体浓度为(88.757±4.978)μg/mL,差异有统计学意义(P<0.05),聚合物沉淀法提取时间为(160.857±1.345)h,低于超速离心法(195.714±2.497)h,差异有统计学意义(P<0.05),且聚合物沉淀法设备成本低于超速离心法的设备成本。结论 相对于超速离心法,聚合物沉淀法提取巨噬细胞外泌体聚合物更为简单、高效、经济。