胰蛋白酶和胆汁对细粒棘球绦虫原头蚴外翻和成虫发育的影响

摘要

目的 探讨胰蛋白酶和犬胆汁对细粒棘球绦虫原头蚴外翻和体外成虫培养发育的影响.方法 无菌条件下采集羊源细粒棘球绦虫原头蚴,用磷酸盐缓冲液(PBS)漂洗,经胃蛋白酶处理后,用0.1％ 亚甲基蓝染色,检测虫体活率>98％ 的原头蚴用不同浓度的犬胆汁(0.005％ ～5％)和胰蛋白酶(0.01％ ～5％)及纯水刺激处理,在不同的培养条件及时间点采集样品,观察原头蚴的死亡率及头节外翻情况.结果 当胆汁终浓度为0.02％ 时,培养48 h头节外翻率最高,可达62.7％;原头蚴可以耐受0.25％ 的胰蛋白酶,但其浓度为0.5％,原头蚴培养48 h时,死亡率为13.7％.研究发现,原头蚴培养的前3d,其培养基中添加0.25％ 的胰蛋白酶和0.02％ 的犬胆汁,培养3 d后去除胰蛋白酶,仅在培养基中加入0.02％ 的犬胆汁原头蚴可以保持高的成虫发育率,达60％ 以上.原头蚴经两次在室温下30 s的刺激,原头蚴外翻率达到100％,但培养24 h后外翻的原头蚴回翻,外翻率与对照无差别(t=0.27,P=0.79).结论 犬胆汁对细粒棘球绦虫原头蚴的外翻和成虫的维持和发育是必须的.适量(0.25％)胰蛋白酶有利于已外翻原头蚴成虫性状发育.仅纯水刺激原头蚴,可以使原头蚴外翻,但不能提高后成虫的发育率.