弹性蛋白样多肽融合胸腺肽α1的原核表达方法

摘要

目的 建立一种低成本生产胸腺肽α1(Tα1)的方法.方法 采用融合表达方式表达Tα1基因,通过人工合成Tα1和弹性蛋白多肽(ELP)基因,构建Tα1-G-ELPn/pET41a(+),同时构建RimJ-pACYCDuet1载体,共转B121,采用自诱导表达培养基进行蛋白表达,表达蛋白通过变温自动聚合沉淀获得高纯度融合蛋白,将融合蛋白羟胺裂解,变温沉淀,收集上清,最终获得目标蛋白.结果 1L培养基最终获得纯度为98%的目标蛋白29.5 mg.结论 建立了一种不需色谱和亲和纯化的生产胸腺肽α1的方法.