酒色着色菌Chromatium vinosum膜结合态氢酶基因hupSL的克隆及分析

摘要

光合细菌酒色着色菌(Chromatium vinosum)含有Hup膜结合态氢酶．根据同科的桃红荚硫菌(Thiocapsa roseopersicina)Hup氢酶同源序列，在结构基因小亚基hups和hupC的保守框上设计1对简并引物：Ps：5′-CCGACCAC(C／G)TACAACGCCTG-3′和Pc：5′-CG(G／C)GACATGATGTC(T／C)TCGCG-3′．通过PCR扩增获得2．6kb的扩增片段．克隆后进行序列分析．结果表明，该片段包含部分的小亚基hupS序列、大亚基hupL的全序列及hupC部分序列．从已知的hupS序列选取适当位点合成引物AS2：5′-CTACGACCATGTCACCGACA-3′．并利用接头寡核苷酸序列P6：5′-CCTT—GTGAAATTGTTATCCGCT-3′．通过PCR扩增获得1．2kb的扩增片段，克隆后进行序列分析．结果表明，该片段包含完整的膜结合态氢酶的小亚基基因hupS．